一些特殊的促细胞附着的物质(如层粘连蛋白、纤维链接蛋白、III型胶原、扩展因子等)可能参加细胞的贴附过程。这些促细胞附着因子均为蛋白质,存在于培养液尤其之中。在培养过程中,这些带阳电荷的促贴附因子先吸附于底物上,悬浮的圆形细胞再与已吸附有促贴附物质的底物附着,以后细胞将伸展成其原来的形态。一-般来说,从底物脱离下来的贴附生长型细胞,不能长期在悬浮中生长而将逐渐退变,超亲水性细胞培养目的,除非这是一些转化了的细胞或细胞。另外,经过无驯化后的细胞,会从贴壁生长转到悬浮生长,目前在生物工程制药领域,趋势是使用无的悬浮培养为主。
悬浮细胞:细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,超亲水性细胞培养,这类细胞称为悬浮细胞。如淋巴细胞。贴壁细胞:在动物细胞培养过程中,必须有可以贴附的支持物表面,其依靠自身分泌或培养基中的贴附因子才能在该表面生长增殖的离体动物的培养细胞。兼性贴壁细胞:有些细胞并不严格地依赖支持物,它们既可以贴附于支持物表面生长,超亲水性细胞培养厂,但在一定条件下,它们还可以在培养基中呈悬浮状态良好地生长,这类细胞称之为兼性贴璧细胞。
2、贴壁细胞如何分离下来?
如果把贴壁的细胞洗下来常用的办法就是加入胰蛋白酶消化,37°C环境下放置3~5min便可,但是残留培养瓶内的胰蛋白酶对细胞有毒性作用,超亲水性细胞培养是什么,所以都会添加低浓度的以中和胰蛋白酶的。用超声的办法也可以把细胞分离下来,但是要注意超声的频率不能太大,而且细胞很娇嫩,超声会导致细胞的。这是由细胞的性质特点决定的。
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