因此，一般的建议步骤是活化羧基使用pH=5-6的MES缓冲液，elisa固定抗体，之后使用PBS缓冲液调节pH=7.2-7.5完成后的偶联反应。
与EDC/NHS类似的是，也可以使用将两个含有氨基的分子连接到一起。比如，先在纳米粒子外包一层二氧化硅，通过APTES等试剂引入氨基，之后通过将氨基修饰的纳米晶和蛋白质的氨基偶联到一起。
微阵列芯片应用流程
1）制备靶点
从生物标本中提取核苷酸并进行标记；
（2）杂交
让靶点与芯片上的cDNA或寡核苷酸序列进行孵育；
（3）获取数据
扫描与探针杂交的靶点表现出来的信号强度
（4）数据分析
从大量数据中得出具有生物学意义的结论
微阵列芯片技术通过测定能够与探针杂交的mRNA的数量，反映表达此mRNA的基因的转录情况，芯片的构建首先要根据研究的需要选择基因及相应的探针，其次是从标本中提取mRNA，并制备出靶点，然后将靶点加入芯片，抗体固定途径，进行孵育杂交、冲洗掉没有杂交的样品以及扫描等操作，得到原始数据，再将这些数据进行标准化和统计分析后得到结论，构造适当的微阵列芯片是开展后续研究的基础。
使用广泛的氨基和羧基偶联剂就要数EDC和NHS（Sulfo-NHS）了。大多数情况下，广西抗体固定，同时使用EDC/NHS的交联于只使用EDC的，NHS的使用能够极大增强偶联效率。但也有个例，醛基固定抗体，比如2012年的一篇工作（Diagnostics (basel). 2012 Aug 27;2(3):23-33.），他们在APETS修饰的金芯片和96孔板表面组装一抗，发现单独使用EDC比同时使用EDC/NHS和EDC/Sulfo-NHS都。
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