物理吸附是简单的抗体固定化方法,包括静电作用、疏水作用、极性相互作用等非共价键作用。优点显而易见—省时省力省钱,缺点也是不可避免—(1)抗体偶联的取向(orientation)不可控,氨基化处理,完全由概率来确定;(2)物理吸附作用力弱,应用时有抗体脱离现象。学中,经常用到物理吸附的地方就是一抗的负载过程。比如在ELISA板(聚)和侧流试纸条(纤维素膜)等表面负载抗体的时候,用到的就是物理吸附作用。
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2.APES(3-氨丙基-乙氧基)
APES必须现用现配。用此方法黏合的玻片应垂直烤片而不能水平烤片,玻璃氨基化处理,否则,组织片中易出现气泡。 APES的使用方法:用50倍稀释(APESl份、49份混合),将洗净的玻片放人稀释好的APES中,停留20~30秒,取出稍停,再人纯或蒸馏水中涮去未结合的APES。置通风橱中晾干即可。注意用APES防脱片处理的载玻片捞片时组织应一步到位.并尽量减少气泡存在,以免影响染色结果。注意不要将APES与其他防脱混合使用。
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