实际操作时需要注意的是,表面醛基修饰,虽然共价偶联的方法优于物理吸附,但基于氨基和羧基的抗体固定方法仍具有一定程度的随机性,表面醛基修饰方法,有时在Fab区(用于结合抗原)存在易于修饰的氨基/羧基,表面醛基修饰厂家,在与固体表面偶联后会造成抗体的失活。在抗体领域,抗体与的偶联同样存在上面所说的问题(由于抗体表面可能存在很多可修饰的氨基酸,不能确定连在哪个部位
物理吸附是简单的抗体固定化方法,包括静电作用、疏水作用、极性相互作用等非共价键作用。优点显而易见—省时省力省钱,缺点也是不可避免—(1)抗体偶联的取向(orientation)不可控,完全由概率来确定;(2)物理吸附作用力弱,应用时有抗体脱离现象。学中,表面醛基修饰公司,经常用到物理吸附的地方就是一抗的负载过程。比如在ELISA板(聚)和侧流试纸条(纤维素膜)等表面负载抗体的时候,用到的就是物理吸附作用。
在每根光纤的顶部蚀刻出一个小洞,可镶嵌直径为3um的微磁珠。每个微磁珠上可以根据不同的需求连接不同的配体,如寡核苷酸、蛋白质、抗体等。制作芯片时,将带有所需配体的不同微磁珠混合后与光纤束进行自组装,通过微珠上寡核苷酸标签序列(address) 确认每根光线上所吸附的不同的微珠。现有微珠芯片上每束光纤可镶嵌1536种微珠,因此,每种微珠在一束光纤中有30次重复。结合在微珠上的寡核苷酸或者蛋白可与荧光标记的配对核酸或配体发生相互作用,发生的信号被激发后通过光纤传递到检测器。
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