这种生物芯片的基因译码速度比传统的Sanger和 Maxax Gilbert法快1000倍,是一种有希望的快速测序方法。1996 年底,蛋白固化素,美国旧金山AFFYM ATRIX公司 Steven Fodor等充分结合并灵活运用了照相平板印刷、计算机、半导体、激光共聚焦扫描、寡糖苷酸DNA合成、荧光标记探针杂交及分子生物学的其他技术,创造了世界上块 DNA芯片或DNA列阵(DNA chip or DNA arrays),即基因芯片。
在每根光纤的顶部蚀刻出一个小洞,可镶嵌直径为3um的微磁珠。每个微磁珠上可以根据不同的需求连接不同的配体,如寡核苷酸、蛋白质、抗体等。制作芯片时,将带有所需配体的不同微磁珠混合后与光纤束进行自组装,蛋白固化温度,通过微珠上寡核苷酸标签序列(address) 确认每根光线上所吸附的不同的微珠。现有微珠芯片上每束光纤可镶嵌1536种微珠,因此,每种微珠在一束光纤中有30次重复。结合在微珠上的寡核苷酸或者蛋白可与荧光标记的配对核酸或配体发生相互作用,发生的信号被激发后通过光纤传递到检测器。
2)用点样法固定在玻璃板上的DNA探针阵列,高水分蛋白固化,通过与荧光标记的靶基因杂交进行检测。这种方法点阵密度可有较大的提高,安徽蛋白固化,各个探针在表面上的结合量也比较一致,但在标准化和批量化生产方面仍有不易克服的困难。3)在玻璃等硬质表面上直接合成的寡核苷酸探针阵列,与荧光标记的靶基因杂交进行检测。该方法把微电子光刻技术与DNA化学合成技术相结合,可以使基因芯片的探针密度大大提高,减少试剂的用量,实现标准化和批量化大规模生产,有着十分重要的发展潜力。
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